Культивирование эмбрионов что это


Культивирование гамет и эмбрионов в эко

После оплодотворения яйцеклетки нуждаются в подращивании в специальных средах. За ними наблюдают на протяжении нескольких дней, а затем выбирают более качественные для подсадки.

Что такое культивирование в ЭКО?

Культивирование гамет и эмбрионов – это способ поддержания развития будущего эмбриона вне организма. Через 18 часов после соединения половых клеток определяют, произошло ли оплодотворение. Если результат положительный, яйцеклетки переносят на специальную среду, которая имитирует жидкость в просвете маточных труб.

Продолжительность культивирования может быть различной:

  • «базовая» длительность составляет 3-4 дня; 
  • продолжительное культивирование – 5-6 дней. 

Выбор срока культивирования зависит от различных факторов:

  • оснащенность клиники; 
  • наличие специальных сред для пролонгированного культивирования; 
  • количество полученных зигот; 
  • состояние организма матери. 

Если от женщины было получено мало яйцеклеток, а оплодотворилось 1-2, то используют перенос на 3 день.

Женщинам до 36 лет с 1 или 2 попыткой ЭКО рекомендуют выполнять подсадку одной бластоцисты на 5 день. Считается, что зародыш к 5 суткам более жизнеспособен, а состояние эндометрия оптимально для имплантации.

Среды для культивирования эмбрионов

До пересадки эмбриона в матку его растят в специальных условиях в инкубаторе. Каждый этап ЭКО протекает в своей среде, которая подобрана с учетом физиологии женского организма. Они стараются повторить процессы, происходящие в маточных трубах по мере продвижения по ним яйцеклетки. Среды для культивирования эмбриона отличаются по своим характеристикам:

  • Среды для последовательного культивирования до 3 дня. Состав доказано повышает частоту дробления, имеет оптимальный уровень рН 7.2, что способствует улучшению показателей развития зародыша. Как результат – большее количество подходит для подсадки. Состоят такие среды из заменимых аминокислот, альбумина, витаминов, лактата кальция, практически не содержат глюкозу. 
  • Среды для культивирования до 5 дня содержит аминокислоты, большое количество глюкозы, фосфат, таурин и витамины. Концентрация веществ учитывает физиологические потребности бластоцисты. 
  • Единые среды подходят для всех этапов ЭКО – от оплодотворения до культивирования и подсадки эмбриона. Вероятность имплантации увеличивает добавление гиалуроновой кислоты. 

Этапы развития эмбриона

В оплодотворенной яйцеклетке ежедневно происходят изменения.

На 1 день оценивается, произошло ли оплодотворение. Яйцеклетка считается оплодотворенной, если в ней различимы 2 пронуклеуса – генетический материал родителей. На этом этапе отбраковывают неподходящий материал:

  • Если имело место оплодотворение двумя или тремя сперматозоидами; 
  • Незрелые яйцеклетки, в которых не произошло оплодотворение. 

Перенос в этот период не выполняют по двум причинам:

  • Яйцеклетка должна находиться в маточной трубе, а не в матке. 
  • Нет критериев для определения жизнеспособной качественной яйцеклетки. 

На 2 день происходит дробление яйцеклетки с образованием двух бластомеров. Специалисты оценивают формы бластомеров, количества безъядерных частей. Чем их больше, тем ниже потенциал клетки на дальнейшее развитие. Пересадку в этот день выполняют только при получении 1-2 яйцеклеток.

На 3 день образуется уже до 8 бластомеров. Если есть какие-то аномалии, то развитие эмбриона прекращается само. В этот день уже возможно выполнение подсадки, но критерии оценки ненадежны в определении жизнеспособности.

На 4 день 16 бластомеров образуют морулу, в которой постепенно образуется полость. В физиологических условиях она попадает в матку. Пересадка в этот день дает хорошие результаты по приживаемости эмбриона.

На 5-6 день полость внутри морулы увеличивается до половины ее объема, она переходит в стадию бластоцисты. Клетки внутри нее располагаются слоями, которые дадут начало телу зародыша и оболочкам с плацентой. Бластоциста освобождается от блестящей оболочки, которая покрывала ее снаружи. С этого момента она способна прикрепляться к стенке матки.

Перенос эмбриона на 5-6 день увеличивает количество прижившихся зародышей и успешных беременностей. По статистике приживается каждый второй зародыш. Это дает возможность подсаживать меньшее число бластоцист, что снижает вероятность многоплодных беременностей.

Протоколы культивирования в ЭКО

Данные о развитии клеток по дням заносятся в виде специальных буквенно-цифровых обозначений в протокол культивирования эмбрионов. Расшифровка отражает состояние клеток, бластоцист. Оцениваются такие показатели:

  • количество бластомеров по дням, день оплодотворения считают нулевым; 
  • процент фрагментации обозначают буквами; 
  • размер бластоцисты определяют по объему полости, присваивают номер от 1 до 6; 
  • две буквы обозначают качество клеточной массы бластоцисты, первая – внутреннего слоя, вторая – трофобласта; 

Качество клеток определяется классом, где 1(А) – отлично, а последний 4(D) – неудовлетворительно. Эмбрионы 4 класса не используются для подсадки и криоконсервирования.

Когда культивирование невозможно?

Для культивирования эмбрионов противопоказаний нет, но при наличии следующих факторов не рекомендуется прибегать к ЭКО без предварительного лечения:

  • миома;
  • злокачественные опухоли; 
  • воспалительные или инфекционные процессы; 
  • обострение хронических заболеваний; 
  • отсутствие матки. 

Метод подращивания эмбрионов повышает процент наступления беременностей. При выборе срока культивирования врач должен отталкиваться от состояния конкретной пациентки.

Юлия Шевченко, акушер-гинеколог, специально для Mirmam.pro

Полезное видео

Культивирование эмбрионов

Процесс культивирования эмбрионов непосредственно относится к процедуре искусственного оплодотворения. На сегодняшний день, бесплодие одного из партнёров больше не является окончательным вердиктом в вопросе возможности иметь детей, так как, благодаря достижениям медицины, доступными являются процедуры оплодотворения яйцеклеток в искусственных условиях, в том числе, метод экстракорпорального оплодотворения (метод ЭКО).

Именно ЭКО считается одним из наиболее эффективных способов зачатия ребёнка парами, в которых, в силу наличия некоторых патологий или заболеваний, женщина не может зачать или выносить плод, или же мужчина имеет репродуктивные проблемы. Такой способ является методом преодоления бесплодия, но он не лечит его.

Общее понятие об ЭКО: этапы процедуры, показания к назначению

Экстракорпоральное оплодотворение подразумевает, что само зачатие происходит не в женском организме, а в условиях лаборатории. Если в силу определённых обстоятельств женщина не может забеременеть, а устранение этих факторов затруднено или невозможно, ЭКО даёт высокие шансы выносить и родить малыша даже с наличием некоторых проблем со здоровьем у мужчины или у женщины.

ЭКО назначается в случаях, когда у пациентки диагностирована непроходимость маточных труб, либо если они были удалены, если у мужчины отмечается низкое количество или малая активность сперматозоидов, или же если ранее осуществлялось 2-4 цикла стимуляции овуляции или внутриматочной инсеминации, но они прошли безуспешно.

Если у женщины выявлено малое количество яйцеклеток, этот фактор может быть показанием к проведению ЭКО с использованием донорских яйцеклеток.

ЭКО эффективно и при эндометриозе – заболевании, вызывающем неконтролируемое разрастание слизистой оболочки матки.

Вся процедура является достаточно сложной и длительной, она осуществляется в несколько этапов, расположенных в строгой последовательности.

Изначально пара проходит общее клинико-биохимическое обследование, чтобы обнаружить наличие показаний или противопоказаний к ЭКО. Следующим шагом является разработка протокола ЭКО – под этим термином понимается режим введения гормональных препаратов, призванных стимулировать яичники на выработку яйцеклеток. Препараты могут вводиться перорально, внутривенно, внутримышечно, обязательно в строго определённом порядке и под наблюдением доктора.

Как только яйцеклетки созревают, их извлекают хирургическим путём, и подвергают оплодотворению мужской спермой в лабораторных условиях.

Следующий этап – культивирование эмбрионов в стерильной среде инкубатора. В среднем, этот период занимает от 2 до 6 дней. Всё это время оплодотворённые яйцеклетки находятся под наблюдением специалистов-репродуктологов.

По достижению эмбрионами нужной стадии развития, они переносятся в полость матки женщины. Обычно в матку вживляются два эмбриона, второй переносится туда спустя некоторое время после первого, чтобы увеличить вероятность беременности.

Далее медики переходят к поддержке лютеиновой фазы менструального цикла – этапа, когда организм производит гормональную подготовку матки к беременности.

Суть процесса культивирования эмбрионов

Процесс культивирования представляет собой создание условий для оплодотворения яйцеклетки, а также наблюдение за развитием из неё эмбрионального организма. Особенность этого процесса заключается в том, что клеточное развитие происходит не в естественных условиях, а в искусственно созданной среде. Состав и качество такой среды идентичны содержимому маточных труб, состоянию стенок и полости матки.

Как происходит подготовка к забору (пункции) яйцеклеток

Культивирование эмбрионов подразумевает необходимость физического изъятия яйцеклетки из яичника женщины. Подобная процедура требует обязательной подготовки, правила которой женщина начинает соблюдать заранее. За пять дней следует избегать половых актов, отказаться от употребления спиртного, жареной, копчёной, жирной пищи. Запрещено посещать баню, сауну, принимать горячие ванны.

Накануне процедуры следует:

  • отказаться от ужина (кушать разрешено не позже 17:30);
  • снять лак или любое покрытие с ногтевых пластин;
  • не употреблять жидкость после 24:00.

Утром перед пункцией запрещено курить, кушать, пить, жевать жевательную резинку. Если женщина носит контактные линзы, на время операции их лучше не надевать.

Дата проведения процедуры должна соотноситься со временем естественной овуляции.

Техника проведения пункции яйцеклеток

По сути, процедура не особенно отличается от трансвагинального УЗИ. Во влагалище пациентке вводится специальный датчик, который выводит на экран аппарата изображение. Однако, в отличие от УЗИ, датчик имеет специальную насадку – устройство для пунктирования.

Пациентку могут погрузить в состояние медикаментозного сна, или осуществить местное обезболивание, так как сама по себе процедура причиняет некоторый дискомфорт и болевые ощущения.

Проведя осмотр близлежащих органов, медик изучает состояние, размеры и расположение яичников непосредственно перед пункцией.

Далее доктор, используя направляющую линию датчика, определяет точность попадания пункционной иглы в фолликул. После этого, из устройства выдвигается сама игла, которая прокалывает стенку влагалища и фолликул.

Прибор всасывает в себя содержимое фолликула по такому же принципу, как происходит забор крови из вены – давлением воздуха. Аспирационная игла втягивается в прибор, после чего он извлекается из влагалища. Содержимое фолликула, вместе с яйцеклеткой, определяется в специальную стерильную пробирку. Процедура повторяется, пока нужное количество яйцеклеток не будет изъято из фолликула.

Весь процесс обычно длится 10-15 минут. Если же у женщины присутствует большое количество созревших яйцеклеток, процедура пункции может продолжаться и 40-50 минут.

В следующие два дня после операции, женщина может ощущать слабость, тянущие боли в нижней части живота, сонливость. Допускаются незначительные кровянистые выделения из влагалища.

Этап культивирования эмбрионов в процессе осуществления ЭКО

После забора яйцеклеток, их подвергают оплодотворению – обычно это происходит через несколько часов после пункции. С момента, когда доктор проводит оценку факта наступления оплодотворения, отсчитывается начало этапа культивирования. День процедуры пункции фолликулов считается нулевым.

В целом, этап культивирования занимает до шести дней.

Первый день. Доктор осматривает ооциты (яйцеклетки, которые подвергались оплодотворению). У большинства из них уже обнаруживаются признаки успешного оплодотворения. Однако, из всех наличествующих ооцитов, примерно 10-15% являются непригодными для дальнейшей культивации, так как являются незрелыми или имеют дегенеративные формы.

Через 16-20 часов после инсеминации у яйцеклеток наблюдается стадия презиготы: в клетке уже присутствуют мужской и женский типы генетического материала, которые ещё не слились в единое целое. В таком случае считается, что оплодотворение прошло успешно.

Существуют случаи, когда одну яйцеклетку оплодотворяют два и более сперматозоида – такие зародыши отбраковываются и не участвуют в дальнейшем в процессе культивации. Возможно и полное отсутствие результата инсеминации, когда не оплодотворяется ни одна яйцеклетка.

В этот период времени оплодотворённую клетку могут подвергнуть консервации. Крайне редко в первый день осуществляется перенос зиготы в женский организм: во-первых, на этой стадии эмбрион ещё должен некоторое время находиться в маточных трубах, а не в матке, во-вторых, медики предпочитают ждать наступления этапа естественной выбраковки эмбрионов, а также проявления у них любых показателей, по которым можно отобрать наиболее удачный для дальнейшей беременности эмбрион.

Второй день. В оплодотворённых яйцеклетках происходит их дробление на две части – бластомеры. В этот период медики уже могут оценить качество зародыша по соотношению объёма зародыша к безъядерным фрагментам в цитоплазме. Клетки, в которых количество безъядерных элементов превышает по объёму сам зародыш, считаются материалом с низким потенциалом к имплантации.

Если на второй день возможно отобрать одну или две яйцеклетки подходящего качества, их могут уже вживить в женский организм.

Третий день. В это время количество оплодотворённых бластомеров приближается к 6-8 клеткам. В течении первых двух дней развитие эмбриона происходило за счёт ресурсов, накопленных яйцеклеткой в период её созревания в яичнике. Если у клетки присутствуют хромосомные патологии, на третий день она останавливается в развитии, то есть в действие вступает так называемый процесс естественной отбраковки.

Долгое время с момента изобретения метода ЭКО, трансплантация эмбриона происходила именно в этот день, так как более длительный процесс культивирования был недоступен из-за несовершенства существующей на тот момент лабораторной техники. Сейчас эта проблема решена развитием более современных технологий ЭКО.

Четвёртый день. Количество бластомеров доходит до 16 штук. В этот период начинается процесс компактизации клеток. Он заключается в том, что межклеточные контакты уплотняются, а поверхность эмбриона сглаживается. Четвёртый день характеризуется также началом стадии морулы. В женском организме в это время зародыш переходит по маточным трубам в полость матки. Именно поэтому имплантация эмбриона часто происходит именно в такой момент. В конце четвёртого дня в моруле образуется полость.

Пятый и шестой день. Зародыш переходит в стадию бластоцисты, когда объём внутренней полости морулы достигает более 50% общего её объёма. Бластоциста состоит из трофэктодермы и эмбриобласта.

Трофэктодерма относится к внешнему слою эмбриона – она отвечает за его прикрепление к эпителию матки. Эмбриобласт формирует начальное развитие тело плода, и представляет собой совокупность клеток внутри трофэктодермического пузыря.

На этом заключительном этапе процесса культивации у медиков есть возможность оценить качество бластоцисты по размеру её полости, по степени развития её составных частей (трофэктодермы и эмбриопласта).

Наиболее эффективно имплантация зародыша осуществляется именно на пятый или шестой день культивации.

По статистике, каждый второй эмбрион шестого дня помещается в матку с дальнейшим успешным исходом. Таким образом удаётся избежать проявлений многоплодия и переноса большого количества эмбрионов в матку для увеличения степени успешности процедуры ЭКО.

Криокультивация эмбрионов: процесс консервации

В некоторых случаях инсеминация яйцеклеток даёт больше 2-3 успешно оплодотворённых зародышей. В случае, если их количество достигает 8-10 штук, медики могут рекомендовать заморозить их. Если первая процедура ЭКО пройдёт неудачно, у пары уже будет материал для следующей попытки.

Для заморозки подходят яйцеклетки, только что прошедшие процесс оплодотворения, бластоцисты, а также четырёх- и восьмиклеточные эмбрионы.

Процесс переноса ранее замороженных яйцеклеток требует некоторой подготовки, при этом пункция и стимуляция яичников исключается. Для женщин с нормальным менструальным циклом и овуляцией, перенос законсервированных зародышей назначается на 7-10 день с начала цикла овуляции.

Если же цикл нарушен, сперва его восстанавливают посредством проведения гормональной терапии.

Проведение ЭКО с использованием замороженных клеток несколько снижает шансы успешного достижения беременности.

Успешность лабораторного этапа ЭКО, в том числе, процесса культивации эмбрионов, зависит от качества исходного биологического материала – сперматозоидов и яйцеклеток, а также от опыта и квалификации медиков, осуществляющих процесс культивации. Культивация занимает до 6 дней, при этом наиболее успешно проходит имплантация, осуществлённая именно на пятый или шестой день развития зародыша.

Культивирование эмбрионов in vitro / Mama66.ru

Культивирование эмбрионов является важным этапом процедуры ЭКО. От того, насколько успешно он пройдет, зависит последующая имплантация эмбриона. Технологии культивации постоянно совершенствуются, при этом особое внимание уделяется питательным средам. Современные препараты максимально близки по составу к естественным условиям материнского организма.

Что такое культивирование эмбриона?

Культивированием эмбрионов называют процесс создания условий для оплодотворения яйцеклетки и ее дальнейшего развития. Все этапы происходят в лабораторных условиях: в специальной среде, имеющей состав практически такой же, как жидкость в матке и фаллопиевых трубах.

Начало культивирования эмбрионов происходит через сутки после извлечения фолликулов из организма женщины. Эмбриолог оценивает наступление оплодотворения и устанавливает предположительную дату переноса материала в матку.

Чем больше экземпляров развивается нормально, тем дольше время их культивирования. В процессе развития специалист может определить, какие из них наиболее жизнеспособны. Отбор позволяет повысить шансы успешной имплантации. Подробнее о имплантации эмбриона при ЭКО→

Длительное культивирование эмбрионов – одна из последних разработок в этой области науки. Суть этой процедуры в том, что выращивание продолжается в течение 5-ти суток до стадии бластоцист с высокой способностью к закреплению на стенке матки. Возможность достичь такого уровня развития появилась благодаря разработке специальных субстанций, имитирующих микросреды женского организма.

Питательные среды для выращивания эмбрионов разрабатываются с 1912 года. Вначале они представляли собой физиологический раствор соли. Более века состав этих субстанций совершенствовался. В 1985 году ведение в них альбумина – источника аминокислот – стало серьезным прорывом и позволило выращивать эмбрионы до 2-3 суток.

Эта среда получила название Human Tubal Fluid. Дальнейшие исследования показали, что развитие оплодотворенной яйцеклетки происходит не в одной и той же субстанции, а в разных. Это привело к созданию двухступенчатых сред, которые используются в настоящее время.

Последняя разработка, улучшающая качество процедуры – культивирование эмбрионов в среде ЭмбриоГен. Она содержит GM-CSF — гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, который в большой концентрации присутствует в матке до и во время прикрепления к стенке эмбриона, а также в течение свей беременности. У женщин с бесплодием он практически отсутствует.

Среда ЭмбриоГен повышает качество и жизнеспособность переносимого при ЭКО материала, увеличивает вероятность успешной имплантации и последующего вынашивания плода. Она незаменима для пациенток, у которых уже были неудачные попытки искусственного оплодотворения, и в тех случаях, когда удается произвести забор всего одной или двух яйцеклеток.

Этапы

Культивирование эмбрионов начинается на следующий день после пункции с забором яйцеклеток и их оплодотворения. Выращивание проходит в несколько этапов:

  1. Этап зрелой яйцеклетки – 1-й день. Эмбриолог оценивает успешность оплодотворения, отделяет некачественный материал. Эта стадия пронуклеусов. Перенос практически не практикуется, но можно криконсервировать клетки.
  2. Этап оплодотворенной яйцеклетки с двумя пронуклеусами – 2-й день. К этому времени образуется зигота (слияние мужского и женского генома), происходит первое дробление. Яйцеклетка становится эмбрионом. Оценивается его качество по степени фрагментации, форме и размерам бластомеров.
  3. Этап 4-клеточного эмбриона – 3-й день. Чаще всего к этому времени эмбрион представляет собой 6 или 8 бластомеров. Происходит активация собственного генома, от того насколько она успешна и своевременна зависят дальнейшие этапы культивирования. Когда в наборе хромосом есть ошибки, развитие останавливается («блок развития in vitro»).
  4. Этап 8-клеточного эмбриона – 4-й день. Начало стадии морулы: пространства между клеток уплотняются, поверхность становится более сглаженной. Эмбрион к этому времени состоит из 10-16 бластоцист. К завершению 4-го дня в моруле появляется полость – начало кавитации.
  5. Этап компактной морулы – 5-й и 6-й день. Объем полости занимает половину всей морулы — эмбрион становится бластоцистой. Он состоит из внутренней клеточной массы и трофобласта, который обеспечивает имплантацию.

Преимущества и недостатки каждого этапа культивирования

В каждых сутках культивирования есть положительные и отрицательные моменты для переноса эмбриона в организм женщины:

  • 1 сутки. Преимущества столь короткого срока в том, что потенциальное вредное воздействие условий культивирования минимально. Проблемы переноса в матку связаны с тем, что физиологически в это время эмбрион должен находиться в фаллопиевой трубе (не в матке). К тому же, трудно оценить его качество.
  • 2 сутки. Плюсы в том, что эмбрион недолго находится вне естественной среды и уже можно сделать первичный отбор качественных экземпляров, так как началось дробление. Минусы: еще нет возможности отделить эмбрионы с нарушениями генома, нельзя провести преимплантационную генетическую диагностику.
  • 3 сутки. Положительный момент в том, что можно отделить эмбрионы, которые отстают в развитии или вовсе его прекратили. Недостатки такие же, как и на 2 сутки.
  • 4 сутки. Положительный момент этого срока в том, что эмбрион достиг стадии, на которой происходит его перемещение из фаллопиевой трубы в матку, то есть введение его в полость будет близко к физиологическому. Столь длительное культивирование эмбрионов «in vitro» способствует преодолению «блока развития» – остановки дробления «в пробирке (стекле)». На этом сроке уже можно выполнить преимплантационную генетическую диагностику (ПГД). Недостаток: сложно оценить качество морул.
  • 5 сутки. На этом сроке в 2 раза повышается вероятность имплантации бластоцист в сравнении с двух- или трехдневными эмбрионами. Произошел отбор наиболее сильных и качественных экземпляров, ими пережит «блок развития» «in vitro», можно выполнить ПГД, оценить качество бластоцист. Минусом можно назвать то, что если все эмбрионы остановились на более ранних стадиях, пациентки испытывают сильный стресс, переживают утрату возможности забеременеть.

Побочные эффекты

При проведении процедуры ЭКО не все яйцеклетки становятся эмбрионами. Согласно статистике, этот показатель достигает в среднем 60-70% при стандартном оплодотворении и 80-90% при интрацитоплазматической инъекции сперматозоида в яйцеклетку.

До стадии бластоцисты, готовой к пересадке в матку, развивается около 40% эмбрионов. И это средние показатели, на практике встречаются случаи с более низкой вероятностью успеха.

Культивирование эмбрионов «in vitro» происходит при постоянной оценке качества экземпляров эмбриологом. Долгое время среды для развития позволяли выращивать оплодотворенную яйцеклетку не более 3-х суток. Можно было получить большее количество материала, но не было возможности точно оценить их жизнеспособность.

С появлением двухступенчатых сред стало доступным длительное культивирование – до 5-6 суток. Стало проще выявлять качественные экземпляры, но их количество уменьшилось. Появился риск, что к 4-5 дню не останется ни одного эмбриона. При этом невозможно установить, что именно привело к остановке их развития: неидеальные искусственные условия выращивания или генетические нарушения.

Культивированием эмбрионов называют процесс наблюдения за их развитием, отбора наиболее жизнестойких экземпляров и определение наиболее благоприятного дня для их переноса в полость матки. Благодаря развитию сред для выращивания эта процедура может длиться до 4-6 дней. К концу этого срока успешная имплантация эмбриона наиболее вероятна в большинстве клинических случаев.

Автор: Ольга Ханова, врач, специально для Mama66.ru

Полезное видео: культивирование эмбрионов

Культивирование эмбрионов при ЭКО: особенности процедуры

Культивирование эмбрионов при ЭКО — это один из этапов искусственного оплодотворения яйцеклетки. Сначала врачами начинается стимуляция роста половых клеток и их созревания. После этого они извлекаются из организма и оплодотворяются в лабораторных условиях. До того как вернуть обратно, оплодотворенные женские гаметы содержат в специальной среде до определенной стадии развития. Этот процесс и носит название «культивирование эмбрионов».

Среда, в которую помещаются зародыши, сходна по составу и температуре жидкости в фаллопиевых трубах и самой матке. Она создается в лаборатории по эмбриологии. Медицинский персонал постоянно отслеживает состояние и рост клеток, обеспечивает статичность условий содержания.

Культивирование эмбрионов начинается на следующий день после забора фолликулов. Врач-эмбриолог проверяет, произошло ли осеменение и каково качество биоматериала. Первые признаки успешной инсеминации обычно заметны через 16–18 часов. Повторная проверка осуществляется спустя сутки от момента соединения мужских и женских половых клеток. Доктор выполняет просматривает чашки с биоматериалом под микроскопом и оценивает скорость деления. В зависимости от его количества рассчитывается примерная дата переноса бластоцист.

Чем больше было получено яйцеклеток, тем дольше длится культивирование эмбрионов. Это делается для того, чтобы в итоге выбрать самые жизнеспособные экземпляры. Они обеспечивают высокую вероятность успешного прикрепления и последующего развития.

Культивирование эмбрионов при ЭКО: содержание и контроль

Выбор генетически здоровых и жизнеспособных зигот является основной задачей. Поэтому в специализированных клиниках часто предварительно проводят генетическую проверку. Она определяет хромосомный набор, вероятность появления у будущего малыша наследственных или связанных с полом патологий. Дальнейшее культивирование проводится только с полностью здоровыми ооцитами. Помимо этого у родителей есть возможность определить половую принадлежность.

Зиготы сохраняются в лабораторных емкостях с метками (чашечках Петри или Нунка, планшетах и т.д.) с питательной (культуральной) средой, насыщенной энергетическими соединениями (глюкоза, молочная и пировиноградная кислота), аминокислотами, необходимыми физиологическими веществами (магний, калий, кальций, натрий, хлор) и сывороточным протеином. Емкости помещаются в особые инкубаторы с содержанием СО2 в 5–6%, 99% влажности и температурой 37°C.

Культивирование эмбрионов при ЭКО продолжается 3–6 дней, деление бластомеров происходит ускоренными темпами. При этом размер практически не меняется: в первый день это 0,1 мм, а в пятый — 0,2 мм. Ежедневно проверяется состояние зигот и заменяется питательный субстрат.

При нормальных функциональных и морфологических показателях клеточное деление происходит быстро, и на 3-й день остаются 2–4 бластомера одинакового размера, без раздробленности и замутненности цитоплазмы.

Предимплантационная проверка проводится с помощью биопсии, FISH-анализа или ПЦР-диагностики.

Пролонгированное культивирование эмбрионов при ЭКО

В области клинической эмбриологии появилась новая методика — продленное культивирование эмбрионов при экстракорпральном оплодотворении. Ученые разработали специальные питательные субстраты, каждый из которых соответствует микросреде отдельного этапа продвижения и формирования плода в организме. Через 5–6 дней оплодотворенная яйцеклетка переходит в стадию бластоцисты и ее можно имплантировать.

Процедура нужна при таких обстоятельствах:

  • у женщины созревает меньше четырех ооцитов, что снижает шансы на беременность;
  • гормональные нарушения у любого из партнеров;
  • возраст пациентки превышает 35 лет;
  • результаты анализов показали присутствие антител к сперматозоидам;
  • недостаточное количество спермы у мужчины или сперматозоидов в ней;
  • непроходимость фаллопиевых труб;
  • эндометриоз (аномальное разрастание эпителиального слоя на маточных стенках);
  • бесплодие неясной этиологии;
  • неудачные попытки зачать ребенка на протяжении полугода;
  • другие патологии, препятствующие зачатию или нормальному формированию плода.

Культивирование эмбрионов при ЭКО: противопоказания

Культивирование эмбрионов при ЭКО не имеет противопоказаний, но есть ряд факторов, при действии которых не рекомендуют проводить экстракорпоральное оплодотворение или назначают предварительное лечение. Среди них:

  • фиброма;
  • злокачественные новообразования;
  • пороки строения половых органов;
  • врожденное или приобретенное отсутствие матки;
  • заболевания, которые при беременности могут нанести вред ребенку или пациентке;
  • обострение хронических патологий;
  • воспалительный процесс;
  • инфекционные болезни.

Культивирование эмбрионов при ЭКО: эффективность

Одной из возможных причин неудачного ЭКО считаются проблемы с процессом инсеминации. Почему так происходит в отдельных случаях, ученые сказать не могут, несмотря на широкий спектр доступных диагностических методов. Многим парам врач советует перейти к другому методу, например, ИКСИ — введение сперматозоида в цитоплазму ооцита.

Даже при хорошем качестве всех элементов биоматериала, только часть из них пригодна для дальнейшего использования. Это связано с тем, что часть из них имеет неподходящий генотип или проблемы с ростом. Согласно статистическим данным, пригодными оказываются только около 68%. Именно поэтому при ЭКО так важно культивирование. При квалифицированной поддержке у пар, страдающих бесплодием, приживается до 95% бластоцист.

Культивирование эмбриона

Рост эмбриона происходит в специальной питательной среде, состав которой максимально приближен к составу жидкости в маточных трубах и самой матке.

При значительном количестве эмбрионов на их культивацию отводится более длительный промежуток времени. Это способствует выбору наиболее жизнеспособных и готовых к имплантации эмбрионов. День их переноса в женский организм устанавливается индивидуально, исходя из готовности эндометрия и других факторов.

Культивация до 5 дней считается оптимальной, так как эмбрионы в стадии бластоцисты максимально готовы к имплантации.

День 0

День пункции фолликула считается отправной точкой культивирования (нулевой день). Эмбриолог ищет наиболее здоровые и жизнеспособные яйцеклетки, которые помещает в инкубатор. Процесс оплодотворения сконцентрированной спермой происходит спустя 4-6 часов после получения яйцеклетки.

День 1

Следующий после пункции день является первым днем культивирования эмбриона. Именно в это время у некоторых яйцеклеток начинают появляться первые признаки оплодотворения (спустя 16-18 часов после процесса слияния яйцеклетки и сперматозоида). Повторная попытка оплодотворения допускается через 24-26 часов после первой.

День 2

На вторые сутки культивации происходит процесс дробления (бластомеры). На этой стадии происходит оценка качества эмбрионов. Перенос на этой стадии может осуществляться при оплодотворении одной или двух яйцеклеток.

День 3

В процессе культивации на третий день происходит деление бластомеров до шести-восьми штук. В это время эмбрион развивается на запасах яйцеклетки. При наличии хромосомных аномалий именно в этот период происходит остановка развития эмбриона.

Раньше большинству женщин именно на третий день производилась пересадка эмбриона. Это объяснялось тем, что дольше их культивировать не представлялось возможным.

На современном этапе стало доступно более длительное культивирование эмбрионов, что значительно повысило их жизнеспособность и приживаемость.

День 4

На четвертый день количество бластомеров достигает шестнадцати. При естественном процессе оплодотворения именно в этот период происходит переход зародыша из маточной трубы в полость матки. Пересаживание эмбриона на этой стадии развития максимально приближено к естественному и дает большой положительный процент приживаемости.

День 5-6

На пятый-шестой день культивации эмбрион уже носит название бластоциста. Перенос в это время происходит все чаще. Каждый второй зародыш, подсаженный на этой стадии, успешно имплантируется.

Культивирование эмбрионов

Культивирование эмбрионов представляет собой процесс ведения наблюдения за оплодотворением яйцеклетки и развитием из нее эмбриона, происходящим в условиях лаборатории по эмбриологии. Все этапы роста протекают в специально изготовленной среде, качественный состав которой почти такой же, как жидкость в маточных трубах и самой матке.

Культивирование эмбрионов - что это за процесс?

Момент начала культивирования начинается на следующий же день после забора фолликулов у женщины. Эмбриолог проводит оценку факта наступления оплодотворения, а исходя из количества нормально оплодотворенных яйцеклеток, устанавливается предположительная дата переноса бластоцист.

Принято считать, что чем большее количество нормально оплодотворенных эмбрионов есть в наличии, тем большим должен быть срок их культивирования. Это дает возможность отобрать самые жизнеспособные экземпляры, которые имеют большие шансы на успешное прикрепление в матке.

Продленное культивирование является новейшей разработкой в области клинической эмбриологии, поскольку эмбрионы, выросшие до бластоцист за 5 суток с момента оплодотворения, обладают высокой способностью к имплантации. Такая процедура стала реальной благодаря разработанным специальным субстанциям, имитирующим каждые отдельные микросреды, которые эмбрион проходит по пути своего продвижения в женском организме.

Криоперенос бластоцисты

Если имеют место несколько десятков успешно оплодотворенных яйцеклеток, то пациентам клиники ЭКО рекомендуют прибегнуть к процедуре их замораживания. Ей могут подвергаться яйцеклетки, только что прошедшие процесс оплодотворения, 4-х или 8-клеточные зародыши, а также бластоцисты. Это дает возможность в случае безрезультатного первого искусственного оплодотворения избежать многочисленных предварительных и дорогостоящих мероприятий.

Перед процедурой переноса замороженных зародышей матка должна пройти процесс подготовки, исключающий пункции и стимуляции яичников. Если у пациентки сохранился нормальный цикл овуляции, то перенос криоконсервированных бластоцист при ЭКО назначается на 7 или 10 день с его начала. Если же природный процесс нарушен, то его восстанавливают при помощи гормональных препаратов, и только потом принимают решение о размораживании зародышей.

Врачи предупреждают, что шансы забеременеть с использованием криоконсервированных яйцеклеток ниже, чем при стандартном ЭКО. Это объясняется тем, что замораживанию подлежат так называемые остатки зародышей, качество которых несколько хуже.

Статьи по теме:
Перенос эмбрионов при ЭКО

Подсадка эмбрионов в матку - завершающий этап ЭКО, от которого зависит, станет ли женщин мамой в ближайшие 9 месяцев или нет. А потому процедура требует предельной осторожности, тщательной подготовки до и правильного поведения после.

Таблица ХГЧ после переноса эмбрионов

После переноса эмбрионов в матку каждая женщина с замиранием сердца ждет результатов анализа на ХГЧ. Ведь если рост этого гормона соответствует таблице норм, это означает, что скоро она станет мамой.

Имплантация эмбриона после ЭКО

Подсадка эмбрионов в полость матки при ЭКО это еще половина дела. Дальше все будет зависеть, закрепится ли зародыш или покинет матку, по каким-то причинам не прижившись к ней. Рассмотрим симптомы, которые может ощущать женщина во время имплантации эмбриона.

Криоконсервация спермы – такая же процедура для мужчин, как и заморозка женских яйцеклеток. Используется она обычно при определенных проблемах с зачатием в паре. Как замораживают сперматозоиды – понаблюдаем за этим процессом в нашей статье.


Смотрите также

Top